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尾加压素Ⅱ在造影剂介导的人肾小管上皮细胞损伤中的作用
王征,吴菲,庞欣欣,陈冠仲,张爱华,范敏华
2016 (05):
304-308.
doi: 10.3969/j.issn.1671-4091.2016.05.012
目的既往文献报道造影剂肾病患者血浆尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ,UⅡ)水平增高,提示UII 在造影剂肾病中可能发挥作用,但具体机制未明。本研究观察尾加压素Ⅱ在造影剂介导的人肾小管上皮细胞氧化应激,凋亡及自噬中的作用。方法人肾小管上皮细胞(HK-2)暴露于不同浓度的造影剂碘普罗胺(25gI/L,200gI/L),不同浓度的UⅡ(10- 5mol/l~10- 8mol/l),UII 联合小剂量造影剂碘普罗胺50gI/L 以及大剂量造影剂碘普罗胺200gI/L,不同处理细胞2h 至24h,测各处理组细胞上清液丙二醛
(malondialdehyde,MDA)的含量,细胞凋亡率,用western blot 检测各组自噬标志物微管相关蛋白1 轻链3-Ⅱ(light chain 3-Ⅱ,LC3Ⅱ),Beclin-1 的表达。结果① 和正常对照组MDA 浓度(20.32±3.00)nmol/ml 相比,UⅡ10- 5mol/l~10- 8mol/l 处理组MDA 浓度[分别为(152.65±18.72)nmol/ml、(149.19±1.17)nmol/ml、(151.12±3.05)nmol/ml、(116.81±6.85)nmol/ml]、碘普罗胺的50gI/l 处理组的MDA 浓度[(99.44±12.00)nmol/ml]显著增加(F=41.863,P=0.000);但UⅡ10-6mol/l+碘普罗胺200gI/l 和碘普罗胺200gI/相比,细胞上清MDA 含量显著减少[(5.95±1.63)nmol/ml 比(41.70±8.46)nmol/ml,P=0.033,95% CI -66.688~-4.798];②和正常对照组凋亡率(3.65±1.17)%相比,各个浓度的UⅡ10-5mol/l- 10- 8mol/l 处理组HK- 2 细胞晚期凋亡率[分别为(9.33±0.23)%、(8.63±2.10)%、(9.93±2.35)%、
(10.10±1.97)% ],以及碘普罗胺50gI/L 组细胞凋亡率[(8.20±1.21)% ]和200gI/L 处理组凋亡率[(15.03±0.55)%]显著增加(F=28.322,P=0.000);UII10-5mol/L+碘普罗胺50gI/L 与单独碘普罗胺50gI/L 相比, 晚期细胞凋亡率显著增加[(15.16 ± 2.27)% 比(8.20 ± 1.21)% ,P=0.031,95% CI 0.681~12.404);但UⅡ10-6mol/L+碘普罗胺200gI/L,与单独碘普罗胺200gI/L 相比, 晚期细胞凋亡率显著减少[(10.27±0.61)%比(15.03±0.55)%,P =<0.001,95% CI -6.481~-3.041];③ 和正常对照相比,小剂量造影剂碘普罗胺50gI/L 处理后LC3II 的表达显著增加[LC3II/actin 灰度值(0.40±0.02)比(0.09±0.02),t=4.989,P =<0.001];和正常对照组相比,UII10-8mol/L 单独处理后LC3II 表达受抑制[LC3 II/actin 灰度值0.029±0.009 比0.05±0.01,t=-2.892,P=0.031]。结论造影剂对肾小管上皮细胞氧化应激、细胞凋亡及自噬均有诱导作用;而UⅡ本身也能独立介导肾小管上皮细胞氧化应激和凋亡,而抑制肾小管上皮细胞自噬,但UⅡ协同小剂量造影剂的促凋亡作用,拮抗大剂量造影剂的促凋亡作用,在大剂量造影剂存在时UⅡ还有减轻细胞氧化应激的作用。鉴于UⅡ作用的双向性,UⅡ在造影剂肾病发病中的作用需要近一步深入研究。
计量指标
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