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脑型失衡综合症可能的分子基础:尿毒症小鼠脑组织水通道蛋白1,5及尿素转运蛋白B1表达的变化
史振伟,刘毅,刘伟,许焱,李晓璐,刘庆阳,王质刚
2015 (11):
676-680.
doi: 10.3969/j.issn.1671-4091.2015.11.009
【摘要】目的探讨水通道蛋白1,5 及尿素转运蛋白B1 在慢性肾衰竭小鼠脑组织中表达水平的变化及影响,进一步揭示血液透析脑型失衡综合征可能的分子基础。方法选用6~8 周龄,雄性BALB/c 小鼠,将小鼠分为正常组(N)、假手术组(S)和慢性肾衰竭模型组(CRF 组)。CRF 模型小鼠通过对其右肾2/3肾皮质透热毁损,并在1 周后将左肾完全切除的方法建立。假手术组小鼠只进行麻醉和手术切口,肾脏不做处理。正常组的小鼠不做任何处理。模型建立后10、40 和70 天3 个时间点每组各处死5 只小鼠,并留取小鼠的肾脏、血清和脑组织标本。检测三组小鼠肾组织病理、血清肌酐和尿素氮;用Western Blotting方法测定在造模后10 天、40 天和70 天3 组小鼠脑组织内水通道蛋白1,5(Aquaporin,AQP)及尿素转运蛋白B1(Urea Transportprotein,UT-B1)的表达。结果CRF 模型组在造模后10 天肾组织病理结果显示部分肾小囊扩张,球囊粘连,肾小管上皮细胞颗粒样变性。造模后40 天、70 天表现为部分肾小球增生硬化,部分肾小管萎缩。造模10,40,70,天CRF 模型组血清肌酐分别是(841.80±336.93)umol/L、(1885.17±689.49)umol/L、(1276.56±496.09)umol/L,与正常组和假手术组肌酐值相比均显著升高(10d:F=26.768,P=0.007;40d:F=34.928,P=0.004;70d:F=29.998,P=0.005),提示慢性肾衰竭模型成功。Western Blotting 检测实验各组脑组织AQP1、AQP5 及UT-B1 的表达,结果显示:在造模10,40,70 天,CRF模型组UT-B1 均未表达,正常组及假手术组表达差别无统计学意义。在造模后10 天正常组AQP1 表达量与假手术组及CRF 组比较均有统计学差异(P<0.05)。CRF 模型组较正常组AQP1 表达量升高46.67%(t=0.122,P=0.001);AQP-5 表达量较正常组升高41.09%(t=0.012, P= 0.001)。在造模后40 天,假手术组与正常组AQP- 1,5 表达量无显著性差异;而CRF 模型组AQP- 1 表达量较正常组升高28.98% (t=4.926,P=0.001),AQP-5 表达量较正常组升高20.83%(t=0.857,P=0.003)。在造模后70 天,假手术组与正常组AQP-1,5 表达量无显著性差异,而CRF 模型组AQP-1 表达量较正常组升高30.26%(t=8.471,P=0.001);AQP-5 表达较正常组升高45.67%(t=3.352,P=0.001)。结论CRF 模型小鼠脑组织AQP1,5 的表达明显增加,同时伴有尿素转运蛋白B1 的不表达或表达明显下降,这一结果为揭示脑型失衡综合症提供了线索。脑组织尿素转运蛋白的低表达导致快速血液透析脑中尿素清除延迟,进而形成脑血尿素浓度梯度,驱动水分通过过多表达的水道蛋白进入脑组织,导致脑水肿。
计量指标
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